アカムシの唾腺染色体の観察実験をしました。
毎年、もっと簡単にキレイに観察できる染色液、方法を試行錯誤中です。
DNAとRNAを染分ける「メチルグリーンピロニン」溶液。
製薬会社によって染色具合がどう異なるのか、比較してみました。
武藤化学と、ナカライテスクのメチルグリーンピロニン溶液１００ｍＬです。
〇値段 （ＨＰより）
武藤：1250円（冷蔵輸送なのでクール宅急便代がかかるかも）
ナカライテスク：16300円
〇溶液の混合物（SDS安全データシートより）
武藤化学：メチルグリーン（0.06%）ピロニン（0.06%）酢酸（0.09％）酢酸ナトリウム（0.54％）精製水（99.95％）
ナカライテスク：メチルグリーン（0.15w/v）ピロニンG（0.25w/v）リン酸緩衝液
〇使用期限
武藤化学：6か月（ボトルに記載）
ナカライテスク：特に記載なし
〇溶液の色
武藤化学：青色
ナカライテスク：暗い紫色
〇染色の違い
武藤化学：RNAの赤色は桜色で、DNAの青色は、スカイブルーで全体的に少し淡い色合いです。
１５×１０倍
１５×４０倍
染色時間を少し長め（約15分ほど）にすると、濃く染色されました。
ナカライテスク：RNAの赤色が鮮やかで、DNAの青色が、青というより濃い紫色という印象です。
１５×１０倍
１５×４０倍
比較してみると、かなり違うことがわかります。
※メチルグリーンだけで染色したら、DNAがキレイに見えるのかなあと、試してみました。
かなり古そうな試薬でしたが、１％ほどの濃度で染色したところこんな感じに。
ただ、試薬が古いのか、濃度の問題か、全体的に薄い印象です。
※ナカライテスクのメチルグリーンピロニンを１％メチルグリーン溶液で2倍に希釈してみました。
１５×１０倍
１５×４０倍
何となくスッキリ？キレイに観察できましたが、DNAは青というより濃い紫という感じです。
水で希釈するだけでもいいのかな？、武藤化学とナカライテスクを混合したら・・・と試してみましたが、同じような感じでした。
武藤化学のメチルグリーンピロニンの方が値段や色合い(青色)を考えるといいのかなあ。
※参照※ 粉末のメチルグリーンピロニンを使用した過去のblogはコチラ
